化肥中绦虫卵致死率的测量 GB/T 19524.2—2004
1 范畴
本标准了化肥中绦虫卵致死率的测定法。
2 测定法基本原理
将碱性溶液与化肥试品充足混和，分离出来绦虫卵，随后用相对密度较绦虫卵密度大的水溶液为飘浮液，使绦虫卵飘浮在溶剂的表层，进而搜集检测。
3 实验方式
3.1 实验仪器：腾宇仪有机肥料配套设施检测仪器
3.2 实验试剂：腾宇仪专用型实验试剂
3.3 检测程序流程：02
3.3.1 绦虫卵分离出来
称量5.0～10.0g试品（颗粒物比较大的试品先要开展碾磨），放于容积为50mL离心管架中，引入NaOH水溶液25～30mL，多加玻璃弹珠约10粒，用橡皮塞塞紧支管，置放在震荡器上，静放30min后，以200～3001rmin頻率震荡10～15min。震荡结束，取下离心管架上的橡皮塞，用玻璃棒将离心管架中的试品充足搅拌，再度用橡皮塞塞紧支管，静放15～30min后，震荡10～15min。
3.3.2 离心式沉积
从震荡器上取下离心管架，拔出橡皮塞，用滴定管汲取纯净水，将黏附于橡皮塞上和支管内腔的试品冲进管内，以2000～2500r/min速率离心式3～5min后，弃去上清液。随后加适当纯净水，并且用玻璃棒将沉淀搅起，按以上方式反复清洗三次。
3.3.3 离心式飘浮
往离心管架中添加小量饱和状态NaNO3水溶液，用玻璃棒将沉淀搅拌成粘稠后，再缓缓加上饱和状态NaNO3水溶液，随加随搅，直加进离支管约1cm才行，用饱和状态NaNO3水溶液清洗玻璃棒，洗剂划入离心管架中，以2000～2500r/min速率离心式3～5min。
用铁丝圈持续将离心管架表面附面层移于盛满一杯纯净水的量杯中，约三十次后，适度提高一些饱和状态NaNO3水溶液于离心管架中，再度拌和、离心式及搬移附面层，这般重复实际操作3～4次，直至附面层玻片观查不上绦虫卵才行。
3.3.4 旋蒸镜检查
将烧瓶中混和悬浮液，根据覆以微孔板火棉胶滤纸的高尔特曼氏布氏漏斗旋蒸。若混和悬浮液的浊度大，可拆换滤纸。
旋蒸结束，用弯管医用镊子将滤纸从布氏漏斗的滤台子上当心取下，放置盖玻片上，滴入二、三滴凡士林水溶液，于高倍显微镜下对一整张滤纸开展查看和绦虫卵记数。当观查有绦虫卵时，将带有绦虫卵的滤纸开展塑造。
3.3.5 塑造
在细胞培养皿的底端铺平一层厚约1cm的药棉，药棉铺上一张直徑与细胞培养皿相适的一般过滤纸。为避免黄曲霉菌和腔肠动物的繁育，可添加甲醛溶液或室内甲醛盐水，以浸湿过滤纸和药棉为宜。
将含绦虫卵的滤纸铺平在滤膜上，细胞培养皿盖上后放置中，在28℃～30℃情况下塑造，塑造操作过程中常常滴入纯净水或甲醛溶液，使滤纸维持湿冷情况。
3.3.6 镜检查
塑造10～15d，自细胞培养皿中取下滤纸放置盖玻片上，滴入凡士林水溶液，使其全透明后，在低瞄准镜下搜索绦虫卵，随后在高倍镜下依据形状，评定卵的好歹，并多方面记数。镜检查时若觉得视线的色度和膜的清晰度不足，可在盖玻片上滴一滴纯净水，用盖玻片从滤纸上刮下少量含卵沉淀，与水搅拌匀称，盖紧盖玻片开展镜检查。
3.3.7 判断
凡带有稚虫的，都觉得是活卵，未卵化或单细胞的都算为死卵。
3.3.8 結果测算
K=100(N1-N2)/ N1
式中：
K—绦虫卵致死率（%）
N1—镜检查总卵数
N2—塑造后镜检查活卵数
